Лечение ВИЧ и СПИД

ПЦР на ВИЧ является достоверным и заслуживающим внимания диагностическим способом, с помощью которого определяется генетическая структура вирусного микроорганизма. Если показатель вирусного микроорганизма в крови минимален, то при проведении исследования наблюдается многократное количественное увеличение вируса. Это говорит о том, что достоверность ПЦР весьма высока.

Как сдают анализ крови на ВИЧ

Перед тем, как сдать анализ, больному на протяжении пары суток не рекомендуется питаться продуктами, богатых жирами. Исследование крови надо сдавать перед едой, последняя трапеза надо чтобы была не позже, чем 8 часов назад. Также на этот день и ранее исключаются алкогольные напитки и жареная пища.

Только такие условия обеспечат точный результат анализа.

Но с помощью общего исследования крови нельзя быть полностью уверенным в том, что в организме существует или отсутствует ВИЧ. Только некоторые параметры, после того, как больной сдал кровь, могут вызвать подозрения у доктора, что больной имеет ВИЧ:

  • Повышена скорость оседания эритроцитов.
  • Низкий гемоглобиновый показатель крови.
  • В крови понижен состав эритроцитарных клеток.
  • Уровень нейтрофильных лейкоцитов понижен.
  • Лимфоцитные клетки в крови повышены.
  • Понижены тромбоциты крови.

Метод определения иммуноглобулинов

Другое название — тест на антитела. В качестве материала для исследования берется кровь. В ней стандартным способом определяют иммуноглобулины: IgG и IgM. Подобный анализ назначают для диагностики аутоиммунных заболеваний, заболеваний системы кроветворения, пищеварительной системы и во многих других ситуациях.

Иммуноглобулины М (IgM) первыми вырабатываются в ответ на вирусную атаку, это так называемые «иммуноглобулины тревоги». Их наличие в крови говорит об острой фазе заболевания.

Иммуноглобулины G (IgG) появляются в крови в среднем спустя 5 дней после иммуноглобулинов М. Если они обнаруживаются в крови, то это может говорить о том, что заболевание прошло острую фазу либо уже перенесено, организм справился с инфекцией и даже выработал иммунитет.

Что за исследование ПЦР

Как правило, делается анализ для того, чтобы определить вирус иммунодефицита в крови донора. Также производится ранняя диагностика данного вида вируса в человеческом организме до вырабатывания белковых соединений кровяной плазмы, препятствующих размножению вирусов и нейтрализующих выделяемые ими токсины (антител).

Эти специфичные белки сыворотки крови определяются стандартными исследованиями на ВИЧ (иммуноферментный анализ), но лишь через определенный период от 1 до 3 месяцев, а при редких случаях спустя год после того, как человек заразился.

Сколько дней делается анализ ПЦР РНК или ДНК на ВИЧ? Если проводить ПЦР диагностику на ВИЧ, то результат, имеющий высокую точность, будет известен спустя две недели, и он будет достоверен на 98,5-99% или спустя 5 суток. В этом случае анализ ПЦР на ВИЧ будет достоверен только на 79,5-80%. Этот анализ на ВИЧ по сравнению с иммуноферментным анализом является трудоемким исследованием, назначается не каждому человеку, а лишь тем, кому он особо показан или на платной основе.

Для чего сдается анализ

Полимеразную цепную реакцию выполняют в следующих случаях:

  • Чтобы подтвердить или опровергнуть наличие вируса иммунодефицита человека во временной промежуток с момента заражения до проявления антител (продолжается от 2 недель до 3 месяцев).
  • Если существуют сомнения в данных иммуноблоттинга.
  • При установленной совокупности всех генов ВИЧ-1 либо другой разновидности ВИЧ-2.
  • Чтобы установить и наблюдать за активностью вирусов в человеческом организме.
  • Чтобы выявить реакцию на тесты к ВИЧ у родившегося ребенка, мать которого является носителем вируса иммунодефицита человека.
  • Если переливают кровь.

В чем преимущество ПЦР

Этот способ диагностики хорош тем, что:

  • Можно выявить первопричину патологического процесса, установить правильный диагноз. Многие диагностические способы, например, ИФА, покажет распадающиеся компоненты метаболизма патогенных возбудителей. Это говорит о том, что в человеческом организме существует инфекционный процесс. При самой ДНК можно определить сегмент, являющийся инфекционным агентом, указывающий на присутствие инфекции в организме.
  • Превосходство способа в том, что в исследуемых тканевых структурах можно выявить исключительный для данного микроорганизма сегмент ДНК с характерным порядком коротких фрагментов нуклеиновой кислоты.
  • Высокая чувствительность способа позволяет обнаружить в человеческом организме клеточные и бактериальные структуры в том случае, если их количество минимально вплоть до нескольких единиц.
  • Делаются исследования быстро, поскольку не надо выделять и взращивать сам вирус. Обрабатывают биологический материал за период от 4 до 5 часов, что даст возможность выявить не только остро протекающую инфекционную патологию, но и скрытый инфекционный процесс. Высокая результативность полимеразно-цепной реакции в том случае, если исследовать вирусы, имеющие высокую антигенную изменчивостью и внутриклеточные паразиты.
  • Микроорганизмы выявляются не только из биоматериалов, взятых у больного, но и из тканевых структур, изъятых из той среды, где обитает больной.

Существует способы ПЦР для диагностики на ВИЧ: качественный и количественный методы. При качественном определяют комплиментарный сегмент ДНК в совокупности наследственного материала (генома) пораженной лимфоцитной клетки. Выявляется не сам вирусный возбудитель, а только те структуры, которые встраиваются вирусом в клетку.

Клеточное ядро будет хранить ДНК вируса, из которой будет происходить его считывание и размножение.

При количественном способе определяется количественный показатель скопированных вирусных РНК. Выполняется лишь у тех, кто инфицирован вирусом иммунодефицита человека для того, чтобы контролировать лечебный результат, определять степень тяжести патологического процесса.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Современные методы позволяют точно подобрать набор веществ, нужных для реакции, а значит, «достроить» именно ДНК SARS-Cov-2, а не другого похожего.

Теперь о недостатках. Первое — относительно высокая цена. Она обусловлена высокой себестоимостью как праймеров, так и оборудования – амплификаторов. Второе — время. Ждать, пока размножится ДНК, нужно несколько часов, а с учетом транспортировки до лаборатории результаты теста пациент может узнать через сутки и более.

Также эффективность теста не превышает 80%. Праймеры для реакции подбираются на основе информации об РНК вируса. Но фрагмент с теми же «буквами» может оказаться и в других микроорганизмах пробы – отсюда ложноположительный результат. Ложноотрицательный результат получится, если вирусные частицы ушли из ротоглотки, спустились дальше по дыхательному пути. Тогда в пробе просто не окажется РНК вируса.

Сдавать тест ПЦР есть смысл в том случае, если человек контактировал с пациентом с подтвержденным коронавирусом.

Преимущества методики ПЦР

Всего разработано более 10 разных методик амплификации, применяемых лабораториями в зависимости от исходных условий и поставленных целей.
Общим для них есть высокая чувствительность (для положительного результата достаточно 40 (!) или менее искомых копий ДНК в 1 мл образца, то есть вероятность ложноотрицательного ответа ничтожно мала. И очень высокая специфичность: вероятность ложноположительного ответа составляет менее 1%.
Но точность результатов сильно зависит от качества сбора диагностического материала, тщательного соблюдения всех технических требований к каждому этапу и качеству оборудования, расходных материалов (буфера, праймеров, раствора для отмывки и т.д.).

Области применения в медицине

В дерматовенерологии ПЦР используют для выявления венерических заболеваний: микоплазменной, хламидийной инфекций, сифилиса, генитального герпеса и др.
Инфекционисты активно используют ПЦР для диагностики туберкулеза, ВИЧ, вирусных гепатитов, герпеса, мононуклеоза, вируса Эпштейн-Барр и др.). А с помощью ПЦР в реальном времени, оценивая вирусную нагрузку, врачи могут составить мнение о динамике заболевания, отклике на лечение, что особенно актуально для пациентов с ВИЧ, принимающих терапию.
Также благодаря ПЦР врачи могут в течение нескольких дней с уверенностью идентифицировать коклюш и паракоклюш, выявить возбудителей эпидемии ОРВИ. Уточняются типы вируса гриппа, циркулирующие на определенной территории, на основании чего появляется возможность разработать эффективную вакцину для каждого сезона гриппа.
В течение суток или быстрее можно установить вид возбудителя кишечной инфекции, а значит – назначить адекватное лечение и обнаружить вероятный источник заражения.
Летом, ПЦР актуальна для диагностики заболеваний, передаваемых иксодовыми клещами: боррелиоза (болезни Лайма), клещевых энцефалитов.
Метод позволяет работать с любым биологическим материалом. Гемотрансмиссивные инфекции (сифилис, ВИЧ, гепатиты, боррелиоз) исследуются по пробе венозной крови или спинномозговой жидкости. Кожные болезни (герпес, грибки) – по соскобу с пораженного участка. Венерические и урологические – по образцу мочи, спермы, влагалищного отделяемого.
Так что в медицине, ПЦР применяется везде, где нужна высокая точность и быстрота получения результатов.

Лабораторные исследования, выполняющиеся методом ПЦР:

пцр диагностика на Инфекции:

Кому мы обязаны появлением метода ПЦР?

Со слов американского биохимика Керри Мюллиса (Kary Mullis), идея идентифицировать живые организмы по короткому участку их генетического кода (ДНК) пришла ему в голову в 1983 году, по пути с работы домой. А в основе этой идеи, лежала работа другого американского биохимика, Артура Корнберга (Arthur Kornberg), которая в свое время не нашла отклика у научного сообщества.

Керри допустил возможность того, чтобы взять молекулу ДНК какого-либо организма, с помощью высокой температуры «распустить» ее спираль на две нити, специфическими маркерами-праймеры пометить уникальные для этого микроорганизма участки ДНК и затем, применив фермент ДНК-полимеразу, создать из двух нитей две новые молекулы ДНК. Но уже содержащие в себе меченные праймеры. И потом останется просто искать эти участки в диагностическом материале.

В итоге, корпорация CETUS, в которой работал Мюлис, выделила ему команду ученых. И в 1985 году, в издании Американского общества генетики человека, появилась публикация с теоретическим обоснованием ПЦР, как метода идентификации генетического материала живых организмов.

Насколько метод достоверен ПЦР

Увы, но данный способ не является идеальным. Связано это с тем, что данные анализа могут быть ошибочными, способны показать ложноположительный результат. К такому диагностическому способу обращаются в том случае, если надо установить диагноз или сделать скрининговые тесты на наличие ВИЧ-инфекции.

Если все выполнено верно: не были перепутаны пробирки, перед забором крови посмотрено назначение, произведена правильная маркировка пробирок медсестрой и многие другие действия, а врачом–лаборантом соблюдался лабораторный регламент (верно выполнил манипуляции с биоматериалом, исключая перекрестное загрязнение и другие нормы), использовалась отличного качества тест-система, то анализ ПЦР может давать ложный положительный результат не более, чем 2% эпизодов.

В результате исследования на наличие антител к коронавирусу COVID-19, проведённого у 162 сотрудников телеканала RT, у 13 человек были найдены антитела IgM, ещё у троих — антитела сразу двух типов: IgM и IgG. У остальных участников тестирования антитела обнаружены не были.

Эксперты прокомментировали итоги тестов и пояснили, что антитела IgM вырабатываются в организме человека на первых этапах после инфицирования, в то время как наличие IgG указывает на формирование иммунитета к инфекции. Сотрудников, у которых присутствовали только антитела IgG, по результатам тестирования обнаружено не было. В итоге 16 человек из 162 сдавших тесты были отправлены на самоизоляцию.

Отметим, что телеканал RT стал первой в России компанией, чьи сотрудники прошли скрининг-тесты на антитела к COVID-19. Именно такие тесты сейчас сдают жители китайского города Ухань, где в декабре 2019 года возникла первая вспышка коронавируса нового типа.

Тесты проводили компания «Институт стволовых клеток человека» и Ассоциация «Силквей ралли».

Ранее по личному поручению Министра обороны Сергея Шойгу Булату Янборисову была организована оперативная поставка этих тест-систем Ассоциацией «Силквей ралли» совместно с Минобороны России из Китая вместе со средствами защиты для военных врачей, а также проведены несколько телемостов между китайскими специалистами по борьбе с COVID-19 и российскими военными врачами.

  • RT

Как сообщается в инструкции к тесту, произведённому китайской компанией Innovita, его клинические испытания основаны на «чётких критериях диагностики/исключения заболевания», клинические исследования проводились в пяти учреждениях.

Чувствительность теста достигает 87,3% при специфичности 100% (специфичность теста — это его способность достоверно определять отсутствие данного заболевания у пациента).

Как отметила главный редактор RT Маргарита Симоньян, руководство канала надеялось, что тестирование поможет выявить уже переболевших и имеющих иммунитет к коронавирусу сотрудников, которые могли бы работать, пока находящиеся в группе риска будут в самоизоляции.

  • RT

«Результат нас потряс. Из 162 человек (которые были протестированы. — RT) переболевших и имеющих иммунитет нет НИ ОДНОГО. Зато 16 человек болеют прямо сейчас! И ни у кого из них нет симптомов. Это десять процентов. Ещё раз. ДЕСЯТЬ ПРОЦЕНТОВ», — написала Маргарита Симоньян в своём Telegram-канале.

С самого начала эпидемии в компании принимались меры предосторожности, сильно опережающие официально установленные правила. Ещё до введения режима самоизоляции в редакции были отменены все командировки для сотрудников, минимизировано количество съёмок. На удалённую работу были переведены все, кто может трудиться из дома, отметила Симоньян.

«Если столько заболевших и ни одного переболевшего с иммунитетом, значит ли это, что мы у подножия страшной горы? Если столько заболевших и, слава Богу, ни одного погибшего, значит ли это, что смертность от «короны» сильно ниже, чем принято думать?» — написала она, попросив специалистов прокомментировать полученные в результате исследования цифры.

Эпидемиологические выводы

Очевидно, что полученную в результате тестирования редакции RT статистику (10% якобы заражённых или заболевших) нельзя экстраполировать на всё население. В противном случае нужно было бы говорить о не менее чем миллионах инфицированных только в одной Москве, отметил Константин Северинов.

«Об этом речи не идёт, такого количества заражений нет», — подчеркнул эксперт.

Как пояснил Артур Исаев, журналистская работа имеет свою специфику и связана с большим количеством социальных контактов. Поэтому переносить полученные в RT данные на ситуацию в стране не стоит.

  • РИА Новости
  • © Илья Питалев

«Большинство людей всё-таки имеют значительно более низкий коэффициент общения, чем журналисты. Находятся дома и общаются только с близкими людьми», — пояснил эксперт.

На вопрос, можно ли сделать вывод о том, что смертность от коронавируса ниже, чем принято считать, если исходить из полученных RT данных, эксперты также ответили отрицательно.

«Во-первых, ваши сотрудники находятся сейчас в середине этапа инфицирования. Возможно, клиническая картина у некоторых из них будет проявляться. Им сейчас надо очень внимательно следить за своим состоянием. Если появятся симптомы одышки, нужно сразу звонить врачу», — пояснил Исаев.

Эксперт добавил, что смертность также сильно зависит от возрастной группы. Поскольку среди протестированных сотрудников RT большинство — люди в возрасте от 20 до 40 лет, то у них априори риск осложнений был ниже среднестатистического.

«Риски увеличиваются с возрастом. Поэтому пока нельзя делать выводы на основании такой маленькой выборки», — подчеркнул эксперт.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *