Дисбиоз у мужчин. Консультация врача

Информация об исследовании

Андрофлор – комплексное исследование микробиоценоза урогенитального тракта у мужчин методом ПЦР. Позволяет определить качественный и количественный состав микрофлоры. Применяется для диагностики и контроля лечения воспалительных инфекционных- заболеваний мочеполовой системы.
Исследование используется для этиологической диагностики острых воспалительных заболеваний урогенитального тракта мужчин, а также для оценки состояния половой системы: своевременная диагностика позволяет избежать развития бесплодия у мужчин с нарушениями микробиоценоза.
Болезни мочеполовой системы – основная причина, приводящая к развитию нарушений нормальной работы мужской репродуктивной системы. Отсутствие своевременной диагностики может привести к хронизации процесса, которая в свою очередь оказывает токсическое воздействие на сперматогенный эпителий, нарушает состав семенной жидкости и проницаемость гематотестикулярного барьера. В последующем возможно развитие аутоиммунных реакций, при которых вырабатываются антиспермальные антитела.

Андрофлор включает в себя определение следующих показателей:

  • геномная ДНК человека;
  • общая бактериальная масса;
  • условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Выявляются следующие группы микроорганизмов:

  • Lactobacillus.
  • Candida.
  • Нормофлора (Staphylococcus, Streptococcus, Corynebacterium).
  • Микроорганизмы, ассоциированные с инфекциями мочевых путей (Enterobacteriaceae/Enterococcus spp.).
  • Микроорганизмы, ассоциированные с негонококковыми уретритами (Haemophilus spp., Pseudomonas aeruginosa, Ralstonia spp., Burkholderia spp.).
  • Возбудители ИППП (Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis).
  • Условно-патогенная микрофлора (Gardnerella vaginalis, Atopobium cluster, Megasphaera/Veillonella/Dialister, Sneathia/Leptotrichia/Fusobacterium, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Mycoplasma hominis, Bacteroides/Porphyromonas spp./Prevotella, Anaerococcus, Peptostreptococcus/Parvimonas, Eubacterium).

14 Октября 2016 Наборы реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «АНДРОФЛОР®», «АНДРОФЛОР® СКРИН»

Болезни мочеполовой системы являются ведущей причиной нарушения репродуктивной функции у мужчин, что имеет огромное социально-экономическое значение, особенно в современных условиях снижения рождаемости.

Наиболее частой причиной болезней мочеполовой системы у мужчин является инфекционно-воспалительный процесс, длительность и интенсивность которого определяет степень нарушений репродуктивной функции: хроническое воспаление оказывает продолжительное токсическое действие на сперматогенный эпителий, нарушает гематотестикулярный барьер, реологические свойства и химический состав семенной жидкости, а также может приводить к развитию аутоиммунных реакций, например к образованию антиспермальных антител.

В процессе развития воспалительной реакции возрастает количество активированных клеток иммунной системы, что сопровождается повышенным образованием свободных радикалов кислорода и увеличением секреции лимфокинов и монокинов, результатом чего является вторичное воспаление в тканях репродуктивного тракта.

Согласно Международной классификации болезней 10-го пересмотра (МКБ-10), в перечень заболеваний мочеполовой системы у мужчин, причиной которых может быть инфекционно-воспалительный процесс, входят:

  • N34.1 Неспецифический уретрит
  • N34.2 Другие уретриты
  • N34.3 Уретральный синдром неуточненный
  • N40 Гиперплазия предстательной железы
  • N41.0 Острый простатит
  • N41.1 Хронический простатит
  • N45 Орхит и эпидидимит
  • N48.1 Баланопостит
  • N48.6 Баланит
  • N49.0 Воспалительные болезни семенного пузырька
  • N49.1 Воспалительные болезни семенного канатика, влагалищной оболочки и семявыносящего протока

Часто этиологическими факторами развития инфекционно-воспалительного процесса являются облигатные патогены и вирусы: Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, Herpes Simplex Virus типов 1 и 2, однако в последние годы отмечается существенное увеличение роли условно-патогенных микроорганизмов: Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Haemophilus, Candida и др. (табл. 1).

Таблица 1. Микроорганизмы – возбудители заболеваний мочеполовой системы у мужчин (по данным литературы)

Значительную роль в нарушении репродуктивного здоровья мужчин играет воспаление предстательной железы. Простатит – самый частый урологический диагноз у мужчин моложе 50 лет и третий по частоте у мужчин старше 50 лет, при этом приблизительно у 10 % мужчин заболевание диагностируется уже на стадии хронического течения .

Острый бактериальный простатит (ОБП) чаще всего является результатом восходящей инфекции мочевого тракта или процедур, затрагивающих мочевой тракт, например уретральной катетеризации или трансректальной биопсии простаты. Бактериальный простатит протекает в острой форме с яркими клиническими проявлениями только в 5 % случаев, что требует обязательной лабораторной диагностики при подозрении на заболевание простаты.

Наиболее часто при ОБП определяются бактерии группы Enterobacteriaceae (87 %), другие грамотрицательные бактерии, такие как Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus и др., встречаются приблизительно в 10 % случаев. В развитии хронической формы заболевания большое значение имеют анаэробные бактерии, в том числе Bacteroides/ Prevotella/ Porphyromonas, ассоциированные с развитием бактериального вагиноза у женщин, а также Burkholderia.

Секреты мужских половых желез (эякулят, секрет простаты, моча после массажа простаты) в случае возникновения простатита часто содержат обильные полимикробные сообщества, включающие как оппортунистические патогены, так и бактерии-комменсалы. Последние играют двойственную роль в мужском урогенитальном тракте, так как при возникновении определенных условий способны вызывать уретриты и простатиты.

Отсутствие патогномоничной симптоматики инфекционно-воспалительных процессов у мужчин, а также преобладание стертого или асимптомного клинического течения обусловливает необходимость введения в практику информативной диагностической технологии, которая позволяет быстро и достоверно выявить фактор воспалительного процесса и выбрать эффективную, этиологически обоснованную лекарственную терапию.

В настоящее время перечень лабораторных исследований, рекомендованный стандартами оказания медицинской помощи при заболеваниях мочеполовой системы у мужчин, включает бактериологический и микробиологический методы (табл. 2).

Таблица 2. Виды лабораторных исследований для диагностики заболеваний мочеполовой системы у мужчин, рекомендованные в стандартах медицинской помощи

No п/п Содержание исследования Заболевание Код по МКБ-10 No Приказа МЗ РФ Дата Приказа МЗ РФ
1 Бактериологическое исследование отделяемого секрета простаты на аэробные и факультативно-анаэробные условно-патогенные микроорганизмы Неспецифический уретрит N34.1 1675н 29.12.2012
Другие уретриты N34.2
Уретральный синдром неуточненный N34.3 1751н
Гиперплазия предстательной железы N40 697н 09.11.2012
Острый простатит N41.0 696н
Хронический простатит N41.1 1673н 29.12.2012
Орхит и эпидидимит N45 696н 09.11.2012
2 Микробиологическое исследование мочи на аэробные и факультативно-анаэробные условно-патогенные микроорганизмы Гиперплазия предстательной железы N40 607н 09.11.2012
Острый простатит N41.0 696н
Хронический простатит N41.1 1673н 29.12.2012
Орхит и эпидидимит N45 696н 09.11.2012
Воспалительные болезни семенного пузырька N49.0 1672н 29.12.2012
Воспалительные болезни семенного канатика, влагалищной оболочки и семявыносящего протока N49.1
3 Микробиологическое исследование отделяемого из уретры на микоплазмы (Mycoplasma genitalium) и уреаплазму (Ureaplasma urealyticum) Неспецифический уретрит N34.1 1675н 29.12.2012
Другие уретриты N34.2
Уретральный синдром неуточненный N34.3 1751н 29.12.2012
Воспалительные болезни семенного пузырька N49.0 1672н 29.12.2012
Воспалительные болезни семенного канатика, влагалищной оболочки и семявыносящего протока N49.1
4 Молекулярно-биологическое исследование отделяемого из уретры на хламидии (Chlamidia trachomatis) Неспецифический уретрит N34.1 1675н 29.12.2012
Другие уретриты N34.2
Уретральный синдром неуточненный N34.3 1751н 29.12.2012
Острый простатит N41.0 696н 09.11.2012
Орхит и эпидидимит N45
Баланопостит N48.1 1684н 29.12.2012
Баланит N48.6
Воспалительные болезни семенного пузырька N49.0 1672н 29.12.2012
Воспалительные болезни семенного канатика, влагалищной оболочки и семявыносящего протока N49.1
5 Микроскопическое исследование отделяемого из уретры на гонококк (Neisseria gonorrhoeae) Неспецифический уретрит N34.1 675н 29.12.2012
Другие уретриты N34.2
Уретральный синдром неуточненный N34.3 1751н 29.12.2012
Острый простатит N41.0 696н 09.11.2012
Орхит и эпидидимит N45
Баланопостит N48.1 1684н 29.12.2012
Баланит N48.6
Воспалительные болезни семенного пузырька N49.0 1672н 29.12.2012
Воспалительные болезни семенного канатика, влагалищной оболочки и семявыносящего протока N49.1
6 Микроскопическое исследование отделяемого из уретры на гарднереллы (Gardnerella vaginalis) Неспецифический уретрит N34.1 1675н 29.12.2012
Другие уретриты N34.2
Уретральный синдром неуточненный N34.3 1751н 29.12.2012
Баланопостит N48.1 1684н 29.12.2012
Баланит N48.6
7 Паразитологическое исследование секрета простаты на трофозоиты трихомонад (Trichomonas vaginalis) Неспецифический уретрит N34.1 1675н 29.12.2012
Другие уретриты N34.2
Уретральный синдром неуточненный N34.3 1751н 29.12.2012
8 Микологическое исследование отделяемого из уретры на грибы рода кандида (Candida spp.) Баланопостит N48.1 1684н 29.12.2012
Баланит N48.6

На данный момент культуральный и микроскопический методы рассматриваются в международной и российской лабораторной практике как имеющие ряд существенных ограничений, которые затрудняют получение объективного результата обследования.

Метод микроскопии – самый быстрый и дешевый, его использование связано с минимальными требованиями к организации лаборатории. Однако использование микроскопии для диагностики инфекционных заболеваний сопряжено:

  • с низкой чувствительностью метода;
  • с субъективностью оценки результатов;
  • с ограниченным спектром выявляемых морфотипов;
  • с приблизительной количественной оценкой.

Так, при диагностике трихомониаза микроскопический метод имеет самую низкую чувствительность: в среднем 30 % (для женщин – 50–60 %, для мужчин – 10–12 %), тогда как метод ПЦР достоверно определяет возбудителя в 90–96 % случаев (Sexually Transmitted Diseases Treatment Guidelines, CDC, 2010).

Национальный центр по предупреждению заболеваний (CDC, USA) с 2006 г. для диагностики трихомониаза у мужчин не рекомендует применение микроскопиии, указывает на информативность культурального исследования выделений, мочи и спермы.

Особенно затруднительна диагностика в случае низкокопийных препаратов или биоматериала, содержащего значительное количество клеток эпителия и лейкоцитов. При сравнении чувствительности микроскопических методов исследования и ПЦР показано, что частота выявляемости N. gonorrhoeae при микроскопии у мужчин – 80–95 %, у женщин – 30–50 %, C. trachomatis – 10–12 %; использование метода ПЦР дает возможность определять указанные микроорганизмы с чувствительностью более 95 % .

Кроме того, при микроскопии мазков можно идентифицировать микроорганизмы, присутствующие в биоматериале в количестве выше 105 КОЕ/мл, тогда как многие факультативно-анаэробные и аэробные бактерии могут проявлять патогенный эффект при сравнительно небольшом количестве (до 104 КОЕ/мл), которое не выявляется при микроскопии. Данные обстоятельства существенно снижают диагностическую ценность микроскопического исследования.

Метод ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (ПЦР-РВ) позволяет выявлять ДНК/РНК микроорганизмов вне зависимости от их культуральных и морфологических особенностей, в том числе микроорганизмов, не поддающихся культивированию; охарактеризовать структуру микробиоты соответствующего биотопа для оценки патогенетической роли каждой группы микроорганизмов у данного пациента.

Комбинация высокой чувствительности и специфичности, скорость (1-1,5 часа) получения результата, возможность количественного анализа и диагностики некультивируемых микроорганизмов делают технологию ПЦР-РВ максимально удобной и клинически значимой в исследовании инфекционных заболеваний.

Количественный анализ микроорганизмов с помощью ПЦР-РВ в настоящее время используется для изучения нормальной, патогенной и условно-патогенной микрофлоры в разных биотопах человека: периодонте , респираторном тракте , образцах из желудочно-кишечного тракта и вагинального микробиома у женщин .

Подобный подход использован в Наборе реагентов для исследования биоценоза урогенитального тракта у женщин методом ПЦР в режиме реального времени «Фемофлор®». Исследования «Фемофлор®» защищены патентом (No 2008 105 063 от 13.02.2008 «Способ диагностики дисбаланса микробиоты различных биотопов человека и степени его выраженности»), разрешены к применению на территории РФ (регистрационное удостоверение No ФСР 2009/04663 от 01.04.2009), ежегодно с 2011 года вводятся в Перечень видов высокотехнологичной медицинской помощи по профилю «Акушерство и гинекология». Получено РАЗРЕШЕНИЕ ФС No2011/375 от 22 ноября 2011 г. на применение новой медицинской технологии «Применение метода полимеразной цепной реакции в реальном времени для оценки микробиоценоза урогенитального тракта у женщин (тест «Фемофлор®»)».

В 2014 г. авторский коллектив врачей и ученых под руководством генерального директора группы компаний «ДНК-Технология» д.б.н. Д. Ю. Трофимова был признан победителем Национальной медицинской премии лучшим врачам России «Призвание» в номинации «За создание нового метода диагностики» – технологии «Фемофлор®».

В настоящее время актуальным направлением в исследовании биоценозов является сравнение микробного состава УГТ половых партнеров с целью разработки эффективного алгоритма лабораторного обследования пар и подбора терапии в случае выявления у одного/обоих партнеров заболеваний репродуктивной системы инфекционной этиологии либо нарушений репродуктивной функции.

Например, при обследовании половых партнеров пациенток с бактериальным вагинозом морфотипы ассоциированных с бактериальным вагинозом микроорганизмов выявлялись у 25 % мужчин, при этом клинические проявления (баланопостит) наблюдались у 3 % пациентов. Кроме того, условно-патогенные микроорганизмы – потенциальные возбудители воспалительных заболеваний УГТ могут попадать в уретру при анальных и орогенитальных контактах, что создает опасность заражения обоих половых партнеров.

Принимая во внимание клиническую и социальную значимость заболеваний мочеполовой системы у мужчин, часто стертого или асимптомного течения, а также важность равноценного обследования обоих половых партнеров при нарушениях репродуктивной функции и наличии заболеваний урогенитального тракта, компания «ДНК-Технология» разработала и внедрила уникальную технологию «Андрофлор®», которая позволяет осуществлять диагностику инфекционно-воспалительных заболевания мочеполовой системы у мужчин (табл. 3).

Таблица 3. Наборы реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®», «Андрофлор® Скрин»

Наименование набора Формат детекции РУ Назначение*
Форез Flash Rt qPCR
Набор реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®» RUO
Набор реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор® Скрин» RUO

* Примечания: RUO – наборы реагентов не имеют регистрационного удостоверения, облагаются НДС 18 %

«Андрофлор®» – это:

  • идентификация возбудителей инфекций, передающихся половым путем (ИППП);
  • анализ условно-патогенных микроорга- низмов, которые могут присутствовать в мочеполовом тракте мужчин или вызывать инфекционно-воспалительные заболевания мочеполовой системы;
  • определение этиологии инфекционного процесса;
  • возможность прогнозирования объема назначаемой терапии;
  • возможность проведения динамических наблюдений;
  • контроль качества взятия биоматериала (количественная оценка геномной ДНК человека).

Одно исследование микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®» позволяет полностью заменить комплекс методов ПЦР-РВ, предлагаемых в стандартах медицинской помощи, которые утверждены Минздравом России в 2012 г., а также расширить его за счет дополнительной диагностики облигатных анаэробов.

Варианты комплектации набора «Андрофлор®» зависят от количества выявляемых микроорганизмов (табл. 4).

Таблица 4. Показатели, определяемые Набором реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®»

Назначение технологии «Андрофлор®»:

  • Технология «Андрофлор®» предназначена для диагностики и мониторинга эффективности лечения любых инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовой системы у мужчин.
  • Технология «Андрофлор® Скрин» предназначена для диагностики и мониторинга лечения острых инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовой системы у мужчин.

Материал для исследования

ВНИМАНИЕ! Для исключения искажений результатов определения состава микрофлоры урогенитального тракта мужчин из-за присутствия в урогенитальном тракте транзиторной микрофлоры в течение трех дней перед взятием биоматериала рекомендуется половое воздержание или защищенный половой контакт.

  • Для этиологической диагностики уретрита, баланопостита, мониторинга терапии данных заболеваний рекомендованными видами биологического материала являются: соскоб из уретры, соскоб с крайней плоти головки полового члена (ГПЧ), моча (первая порция утренней мочи используется только для идентификации патогенов).
  • Для этиологической диагностики простатита, мужского бесплодия, мониторинга терапии данных заболеваний рекомендованными видами биологического материала являются: секрет (сок) простаты*, остаточная моча после массажа простаты, эякулят, биопсийный материал из ткани простаты.

*При подозрении на острый простатит выполнять массаж простаты категорически запрещено!
Интерпретация результатов исследования формируется согласно алгоритму (рис. 1).

Рис. 1. Принципиальная схема алгоритма автоматической трактовки результатов

Аналитическая чувствительность:

Формат наборов: наборы раскапаны в стрипованные пробирки (8 шт. по 0,2 мл).

Температура хранения: компоненты набора следует хранить при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности.

Срок годности:12 месяцев.

Наборы реагентов для выделения ДНК: ПРОБА-НК-ПЛЮС; ПРОБА-ГС-ПЛЮС.

Оборудование, необходимое для проведения анализа: приборы серии ДТ производства ООО «НПО ДНК-Технология» (ДТлайт, ДТпрайм, ДТ-96).

Для проведения анализа с использованием стрипованных пробирок необходимо дополнительное оборудование: штатив и насадка на микроцентрифугу (вортекс) для стрипованного пластика.

Особенности набора:

  • Одновременная детекция (мультиплексный анализ) – в одной пробирке определяется несколько ДНК-мишеней.
  • Внутренний контрольный образец (ВК) присутствует в каждой пробирке с амплификационной смесью, необходим для контроля прохождения полимеразной цепной реакции.
  • Геномная ДНК человека (ГДЧ) требуется для анализа качества взятия исследуемого материала.
  • Маркер используется прибором для определения положения стрипованных пробирок (стрипов) в плашке.

Приборы серии ДТ производства компании «ДНК-Технология» оснащены специально разра- ботанным русскоязычным программным обеспечением (ПО), поддерживающим автоматическую обработку данных и выдачу результатов исследования в удобной для интерпретации форме (рис. 2).

Рис. 2. Приборы серии ДТ: А. Амплификатор детектирующий ДТпрайм Б. Амплификатор детектирующий ДТлайт

Уникальные технические характеристики приборов позволяют существенно сократить общее время проведения анализа. Это значительно экономит время исследования и обеспечивает высокую пропускную способность лаборатории.

Существенным преимуществом ПО является возможность одновременной реализации качественного и количественного мультиплексного анализа.

Кроме того, программа позволяет выдавать результаты в удобной и наглядной форме для анализа полученных данных врачами-клиницистами (рис. 3).

Рис. 3. Бланки выдачи результатов «Андрофлор®» в формате Rt (приборы серии ДТ). А, В – анализ оптических измерений (канал Fam). Б, Г – бланки выдачи результатов

Рис 4. Бланки выдачи результатов «Андрофлор® Скрин» в формате Rt (приборы серии ДТ). А, В – анализ оптических измерений (канал Fam). Б, Г – бланки выдачи результатов

Литература

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *